Неинвазивный пренатальный тест

Содержание

Пренатальный скрининг: уточняющие тесты

Неинвазивный пренатальный тест

«Плохой» результат пренатального скрининга — не редкость.

В соответствии с Рекомендациями FIGO (2015)1, если вычисленный риск рождения ребенка с хромосомной патологией составляет 1:100 и выше, пациентке обязаны предложить проведение уточняющих тестов.

Каждый раз, когда мы получаем «плохие» результаты, мы тревожимся вместе с пациенткой, но стараемся объяснить, что плакать пока рано. Уточняющие тесты чаще всего позволяют достоверно доказать, что малыш здоров.

— Там все девочки плакали, я одна была уверена, что все будет в порядке! — рассказывает мне беременная, гордо демонстрируя бумажку с результатом 46XY. У нас родится отличный здоровый мальчик без хромосомной патологии.

Да, вероятность того, что ребенок совершенно здоров, очень высока. Но если плод все-таки имеет генетические отклонения, об этом необходимо знать заранее. Консультирование в таких случаях проводят специалисты по медицинской генетике, которые могут подробно рассказать о результатах уточняющего тестирования и помочь родителям принять решение о сохранении или прерывании беременности.

По сути, уточняющих тестов всего два — инвазивный и неинвазивный. Инвазивный тест — это вмешательство в окружающий плода мир для получения клеточного материала.

Неинвазивный — исследование, которое проводится по крови матери. Безусловно, сдать кровь из вены после 10-й недели беременности — совсем не страшно, но очень дорого и не оплачивается фондом ОМС.

Обе методики имеют свои ограничения, поэтому стоит рассмотреть их подробнее.

Инвазивные тесты

Инвазивные тесты выполняются высококвалифицированными специалистами. Задача тестов — получить клетки плода, чтобы изучить его хромосомный набор. В сроке 10–13 недель проводится биопсия ворсин хориона. Через шейку вводится специальный инструмент, позволяющий отщипнуть небольшие фрагменты плаценты.

Если время для биопсии хориона упущено, в сроке 15–20 недель выполняют амниоцентез — под контролем УЗИ тонкой иглой выполняют прокол и собирают небольшое количество околоплодных вод.

Обе процедуры имеют свои риски и 1–2%-ную вероятность выкидыша. Именно поэтому инвазивные тесты рекомендованы только в тех случаях, когда вероятность рождения ребенка с хромосомным заболеванием выше, чем 1–2 %.

Клетки, полученные при инвазивных процедурах, могут исследовать разными способами:

  • кариотипирование — исследование выполняют в течение 2 недель, хромосомы плода выстраивают в специальном порядке и убеждаются в том, что в наборе нет лишних или поврежденных;
  • FISH-метод — быстрый способ исключить самые распространенные аномалии в 13-й, 18-й, 21-й паре и аномалии половых хромосом X и Y. Если найдены отклонения — обязательно проводится кариотипирование;
  • расширенный молекулярно-генетический анализ, который умеет находить микроделеции — небольшие поломки хромосом, приводящие к серьезным заболеваниям;
  • специфические ДНК-тесты на конкретные заболевания. Например, если здоровые родители являются носителями гена муковисцидоза, они могут передать ребенку по «больному» гену каждый и ребенок будет страдать тяжелым заболеванием.

НИПТ — неинвазивное пренатальное тестирование

Это совершенно новый метод, который постепенно входит в клиническую практику с 2011 года. Начиная с 9–10-й недели беременности выделяют плацентарные клетки (трофобласты) в крови матери и исследуют их ДНК. Этого оказалось достаточно, чтобы в очень раннем сроке беременности (до стандартного первого скрининга) с высокой точностью диагностировать хромосомную патологию плода.

Новый метод демонстрирует отличную эффективность. По данным исследователей, из 265 женщин с «плохими» результатами стандартного скрининга только у 9 пациенток действительно выявят хромосомную патологию плода2. Если патологию выявили с помощью НИПТ, инвазивные методы подтвердят заболевание у 9 из 10 плодов3.

НИПТ — достаточно дорогое исследование. Высокоточное определение пола ребенка — совсем небольшой бесплатный бонус метода. Конечно, чем больше параметров предстоит изучить, тем дороже анализ.

Стандартная панель НИПТ с точностью 99 % позволяет исключить синдром Дауна, Эдвардса, Патау и аномалии половых хромосом (это большая группа заболеваний, когда вместо двух половых половых хромосом находят одну, три и даже четыре).

Самый дорогой вариант — расширенное исследование с микроделециями (маленькими поломками хромосом), позволяющее исключить/подтвердить 22q11.2 делецию (синдром Ди Джорджи), 1p36 делецию (синдром Ангельмана, синдром Прадера – Вилли, синдром кошачьего крика).

Например, 22q11.2 делецию плода у молодых мам выявляют чаще, чем синдром Дауна4, причем эту патологию могут не сразу заметить даже у новорожденных, а для нее характерны врожденные пороки сердца, аномалии строения нёба, задержка развития, шизофрения в молодом возрасте.

Кому стоит делать НИПТ

В интернете можно найти огромное количество показаний для проведения этого теста. Это и возраст матери 35+, и привычное невынашивание беременности, и случаи рождения таких деток в семье. На самом деле единственным показанием для проведения НИПТ является желание женщины.

FIGO в 2015 году предложила использовать следующий алгоритм диагностики:

  • при риске 1:100 и выше проводить сразу инвазивную диагностику, или сначала НИПТ, затем инвазивную диагностику тем, у кого получен аномальный результат;
  • при риске от 1:101 до 1:2500 проведение НИПТ носит рекомендательный характер;
  • при риске менее 1:2500 — углубленный пренатальный скрининг не показан.

Гораздо важнее понимать, в каких случаях использование НИПТ невозможно или нецелесообразно:

  • переливание крови в анамнезе;
  • пересадка костного мозга в анамнезе;
  • онкологические заболевания матери;
  • многоплодная беременность (три плода и более);
  • двойня, в которой один из плодов замер;
  • донорская яйцеклетка/Суррогатное материнство;
  • наличие УЗ-маркеров хромосомных патологий (в этом случае НИПТ уже не нужен).

В этом случае очень сложно разделить, где чья ДНК (матери, одного, или второго, или третьего плода, донора крови либо тканей), поэтому результаты получаются неинформативными.

Неинвазивные тесты имеют различные фирменные названия (Panorama, Prenetix, Harmony, Veracity) и несколько отличаются по технике выполнения. Каждая компания тщательно лелеет свою «придумку» и считает, что их НИПТ гораздо лучше других.

Что надо учитывать?

Если первый скрининг выявил высокий риск хромосомных аномалий, важно понимать, что риск — это не диагноз.

Но если женщина категорически против рождения ребенка с хромосомной аномалией (важно понимать, что на сегодняшнем этапе развития медицины такие болезни неизлечимы), проведение инвазивного теста обязательно.

Прервать беременность после 12-й недели можно только по решению врачебной комиссии с серьезными аргументами на руках.

Если женщина принимает решение вынашивать беременность в любом случае, она вправе отказаться от дальнейших диагностических процедур. Вместе с тем более определенная информация поможет родителям подготовиться к рождению «синдромного» ребенка: найти группы поддержки в соцсетях, поговорить с родителями, воспитывающими таких детей, заранее составить план медицинского обслуживания.

Что касается выбора между инвазивными методиками и НИПТ, то важно понимать, что материалы инвазивного теста можно исследовать разными способами — и обнаруживать всевозможные заболевания.

А методика НИПТ отвечает только на те вопросы, которые сформулированы врачом.

Именно поэтому «последнее слово» все еще остается за инвазивной диагностикой, хотя ложноположительные результаты встречаются у любого вида тестирования.

Также родители имеют право полностью отказаться от проведения скрининга или любых уточняющих тестов. В этом случае достаточно подписать информированный добровольный отказ от вмешательства. Однако если женщина передумает и захочет все-таки выполнить тестирование, некоторые из них (те, которые проводятся строго в определенные сроки беременности) сделать уже не получится.

Оксана Богдашевская

Фото istockphoto.com

Неинвазивный пренатальный тест — что это?

Неинвазивный пренатальный тест

О неинвазивном пренатальном тесте (НИПТ) как о единственной методике, позволяющей с 99% вероятностью определить генетическое здоровье малыша, стали говорить совсем недавно.

Утверждается, что данный тест не причиняет ни малейшего вреда матери и не вызывает отклонения у ребенка. Безопасной альтернативы этому анализу пока не существует, и единственное, что смущает будущих родителей – достаточно высокая цена обследования. Поэтому прежде, чем решаться на проведение теста следует детально ознакомиться с его принципами и нюансами работы.

Что такое НИПТ и как он проводится?

Еще несколько лет назад женщинам, становившимся на учет по беременности и числящимся в «группе риска» рекомендовали проходить другие тесты на возможные генетические аномалии: амниоцентез или биопсию хориона.

Недостаток этих процедур заключался в том, что для получения требуемой информации было необходимо сделать прокол амниотической оболочки для забора образца околоплодных вод.

Повреждение амниотической оболочки могло негативно сказаться на течении беременности, это существенно повышало риск выкидыша.

Неинвазивный пренатальный тест лишен подобных рисков. Его суть заключается в том, что кровь женщины при беременности содержит свободные части ДНК развивающегося плода. Исследуя генетический материал плода, врач может с максимальной точностью определить наличие хромосомных аномалий ребенка.

Для проведения этого теста у беременной берется венозная кровь (обычно требуется не более 18 мл). Кровь помещается в аппарат-центрифугу и охлаждается до нужной температуры.

После этого специалист уже может выделить ДНК ребенка, а затем отправить макромолекулу в амплификатор – прибор, в котором генетический материал «размножается».

Далее врачу предстоит провести самую сложную и ответственную процедуру: анализ и математический обсчет ДНК плода с помощью компьютерной программы.

После проведения анализа каждой женщине присваивается ее персональная библиотека генетического материала.

Интересно!  3д УЗИ — яркие впечатления будущих родителей

Результат будет доступен примерно через 14 дней после сдачи крови. Для расшифровки данных беременной будет необходимо обратиться к врачу-генетику. Консультация генетика также обязательна перед проведением анализа.

В некоторых случаях результата придется ждать дольше, так как иногда анализы отправляются для более подробного исследования в Америку.

Технология проведения теста в России появилась относительно недавно, и, несмотря на то, что среди отечественных врачей также есть отличные профессионалы, сложные и редкие данные получить можно только в специальных условиях.

Длительное исследование позволяет выявить незаметные при первичном анализе хромосомные нарушения, приводящие к умственной отсталости и задержке развития.

Биохимический тест с забором венозной крови проводится не ранее, чем на 9 неделе беременности.

Если в ходе неинвазивного пренатального теста не будут выявлены никакие нарушения, и здоровью малыша ничто не угрожает, женщина продолжает посещение клиники в обычном порядке.

При положительном результате теста врачам приходится прибегнуть к инвазивному методу исследования (с забором околоплодных вод) для подтверждения диагноза. Согласно законодательству, клиника имеет основание и право на выдачу женщине направления на прерывание беременности по медицинским показаниям при положительном результате теста.

По желанию отца может быть произведен анализ его ДНК. Для этого не требуется сдача крови: берется только мазок слизистой рта.

Кому нужно проходить неинвазивный пренатальный тест?

Проведение НИПТ рекомендовано таким категориям женщин:

1 Женщины старше 35 лет: в этом возрасте несколько возрастает вероятность развития внутриутробных аномалий плода при беременности. Безусловно, дети с генетическими отклонениями рождаются и у совсем молодых девушек. Но следует учитывать, что в возрасте 35-40 лет естественные процессы старения организма оказывают влияние на качество яйцеклеток.

Поэтому у женщин в таком возрасте шансы на успешное вынашивание будут меньшими.

2 Беременные, чьи результаты биохимических анализов и УЗИ подтвердили риск развития ребенка с генетическими отклонениями.

Интересно!  Доплер УЗИ при беременности: что это, как делают (видео)

3 Случаи, когда генетическое исследование требуется, но инвазивные методы запрещены по медицинским показаниям. Например, велика вероятность выкидыша, диагностировано предлежание плаценты.

4 Женщины, забеременевшие в результате ЭКО. Проведение этого теста невозможно при вынашивании многоплодной беременности. Также исследование не осуществляется при суррогатном материнстве.

Неинвазивный пренатальный тест способен выявить такие распространенные хромосомные нарушения, как синдром Патау, синдром Дауна и синдром Эдвардса. На выявление этих же нарушений направлен скрининг первого триместра, который беременные проходят на сроке 10-14 недель. Но скрининг определяет лишь 80% вероятности наличия аномалий, и часто его результаты бывают ложноположительными.

Неинвазивный пренатальный тест: цена и отзывы

Цена на НИПТ  в разных клиниках колеблется от 30 000 до 55 000 рублей. Ожидается, что в ближайшее десятилетие данный метод диагностики перестанет быть редким, оборудование появится в большем количестве клиник, поэтому и цена анализа станет меньшей.

Стоимость теста также отличается в зависимости от типа исследования: тест может быть простым или расширенным. В большинстве случаев для получения клинической картины достаточно стандартного теста.

Из-за дороговизны данное исследование не включено в программу медицинского страхования.

Тест не считается обязательным, и женщина сама принимает решение о его проведении, исходя из собственных финансовых возможностей. Тем не менее, оснований для волнений у беременной немного.

Генетические отклонения случаются достаточно редко. Проведение теста рационально в том случае, если вы относитесь к какой-либо из групп риска.

Отзывы на неинвазивный пренатальный тест среди беременных, прошедших исследование, преимущественно положительные. Женщины отмечают полное соответствие результатов диагностики с реальными показателями.

Выявление опухолей с помощью пренатального теста

Помимо хромосомных аномалий, НИПТ дает возможность своевременно выявить наличие онкологических заболеваний у беременной. В плазме крови может присутствовать ДНК опухолевых клеток.

При наличии раковых опухолей в крови женщины будут обнаружены неблагоприятные изменения генома, нетипичные ни для генома беременной, ни для генома развивающегося плода.

Что такое НИПТ тест | Неинвазивный пренатальный тест ДНК

Неинвазивный пренатальный тест

Если вы сдаёте тест Пренетикс в Москве, в лаборатории Генетико, по адресу Москва, ул. Губкина, д. 3, стр. 1, стоимость теста на три хромосомы для вас — всего 19 900* ₽, и плюс к этому вас ждут полезные подарки!

Для тех, кто сдает НИПТ не в Москве, также предусмотрена скидка*. На услуги доставки скидка не распространяется.

Что такое Пренетикс, на каком сроке его делают

Неинвазивный пренатальный тест (НИПТ) — возможность на раннем сроке выявить у плода самые распространённые генетические заболевания: синдромы Дауна, Эдвардса, Патау, Тёрнера.

  • Проводится после десяти полных акушерских недель беременности
  • Результаты в течение 12 рабочих дней
  • Безопасен для здоровья женщины и ребёнка
  • Доступен во всех регионах России
  • Признан самым объективным и точным в мире
> 22 000Количество пациентов, участвовавших в тестировании технологии99,9%Точность теста, подтверждённая исследованиями>1 000 000Количество женщин из разных стран, доверившихся тесту Пренетикс

Зачем проходить тест Пренетикс

Пренетикс — безопасное подтверждение диагноза с точностью 99,9%.

До изобретения неинвазивных тестов было два способа подтвердить диагноз: изучить ткань плода с помощью прокола брюшной стенки или дождаться родов.

Хотя вероятность прерывания беременности при инвазивной диагностике невысокая, не все хотели рисковать жизнью ребёнка. Дожидаться родов и оставаться в неведении — стресс для семьи.

Сейчас есть альтернатива проколу — неинвазивный пренатальный ДНК тест. Так как технология новая, в России тестирование ещё не считается обязательным. Но Всемирная Организация Здравоохранения рекомендует его каждой беременной: даже низкий риск 1:10 000 по первому скринингу означает, что из десяти тысяч детей один рождается больным.

Что показывает Пренетикс

Неинвазивная пренатальная диагностика выявляет следующие патологии:

  1. Синдром Дауна. Тяжёлая умственная отсталость и врождённые пороки. Самая распространённая хромосомная патология.
  2. Синдром Эдвардса. Олигофрения: патологии черепа, мозга, грудной клетки, сердца. До 5% новорожденных с синдромом Эдвардса доживает до года.
  3. Синдром Патау. Тяжелые пороки развития, из 100 детей до года доживают 5.
  4. Синдром Клайнфельтера. Мужское заболевание: патологии эндокринной системы, бесплодие, импотенция.
  5. Синдром Тёрнера. Женское заболевание: бесплодие, физическая отсталость, склонность к ожирению и сердечным болезням.
  6. Дополнительные Х и Y хромосомы. Небольшие отклонения в психическом и/или физическом отклонении.

Что не покажет Пренетикс

Пренетикс изучает только патологии хромосом 21, 18, 13, X и Y. Мутации остальных хромосом, наследственные заболевания анализ не определяет. НИПТ-тест не покажет достоверный результат в следующих случаях:

  • Беременность более, чем двумя плодами;
  • Хромосомные мутации у матери;
  • Злокачественные опухоли;
  • Донорский костный мозг или органы у матери;
  • Недавнее переливание донорской крови;
  • Гибель одного из близнецов.

Почему Пренетикс точный на 99,9%: диагностика по новой технологии

Исследовать молекулы ДНК целиком нельзя, поэтому при тестировании их разбивают на участки. В каждом участке изучается последовательность структурных блоков молекулы — нуклеотидов. Нарушения в порядке нуклеотидов вызывают отклонения в развитии человека.

Секвенирование — чтение последовательности нуклеотидов в ДНК. Есть два метода секвенирования: исследование случайных и выборочных участков. Случайное исследование неэффективно: изучают все участки ДНК, повышается риск не выявить патологию в нужных. При выборочном секвенировании исследуют только те участки, мутации которых приводят к распространённым порокам развития.

Пренетикс основан на выборочном исследовании фрагментов ДНК, при этом каждый участок прочитывают больше раз, чем в других технологиях. Затем компьютерная программа оценивает данные исследования, рост, вес, возраст беременной, концентрацию вкДНК в крови и выдаёт результаты.

Преимущества дородовой диагностики Пренетикс

Точный результатОдиннадцать клинических исследований, из которых три — независимые, показали, что Пренетикс достоверен в 99,9% случаев. По другим неинвазивным анализам количество исследований в общей сумме меньше, чем по Пренетикс, поэтому результат не гарантирован.
Ранний срокПренетикс проводится на полной 10 неделе беременности. Пренатальный ДНК-тест даст точный ответ о наличии или отсутствии хромосомных патологий на самом раннем сроке беременности.
Любой вид беременностиТолько Пренетикс покажет правдивый результат при двуплодной беременности, суррогатном материнстве, ЭКО, если использованы донорские сперматозоиды или яйцеклетки. Другие тесты не сработают.
Тестирование по всей РоссииПредставительства Центра Genetico работают в каждом регионе. Достаточно сдать анализ крови в Москве или любом другом городе и через 12 рабочих дней получить результат.
Перепроверка результатаЧтобы правильно поставить диагноз, перед выдачей результаты анализа проверяют два врача.
Определение пола ребёнка на раннем срокеНеинвазивный анализ крови покажет точный пол ребёнка с десяти недель, в том числе при двуплодной беременности. На УЗИ половые признаки заметны не ранее 23 недели.
Отсутствие рисковКровь для анализа забирают из вены, поэтому нет риска выкидыша или занесения инфекции, как в случае инвазивной диагностики.
НадёжностьТест прошли более 1 000 000 женщин по всему миру. В исследованиях участвовали более 22 000 человек.

Кому рекомендован тест

Применение неинвазивного пренатального теста Пренетикс позволяет повысить надёжность традиционного 1 скрининга на хромосомные патологии и с большей информированностью вести беременность.

Неинвазивный пренатальный тест Пренетикс эффективен и в особых случаях. Его можно проводить при:

  • Двуплодной беременности,
  • Беременности после ЭКО,
  • Беременности с использованием суррогатного материнства (с использованием донорских яйцеклеток).

Как пройти НИПТ Пренетикс

Обратитесь в Центр Genetico или оформите заказ на сайте. С вами заключат договор и назначат день забора крови. Результаты будут готовы через 12 дней после забора крови или раньше. Если диагноз подтвердится, запишитесь на консультацию к врачу Центра Genetico.

Сколько стоит Пренетикс

Цена на неинвазивный пренатальный тест Пренетикс 29 000 рублей (по акции — 22 000*). На услуги доставки скидка не распространяется. Можно пройти неинвазивный тест в Москве в центральной лаборатории Genetico, в представительствах в Санкт-Петербурге или оформить заказ на сайте (действует на всей территории РФ).

*Предложение ограничено и действует со 30.09 по 31.10.2019 г.

Неинвазивный пренатальный тест

Неинвазивный пренатальный тест

В отличие от кордоцентеза (получение пуповинной крови), амниоцентеза (получение амниотической жидкости с помощью пункции), биопсии хориона (забор биоптата при жизни) которые являются инвазивными процедурами, пренатальный тест является неинвазивным, это его огромное преимущество.

История и возможности диагностики

Проходить неинвазивный пренатальный тест беременным рекомендуют авторитетные мировые организации в области гинекологии, акушерства, генетики:

  • ACOG – Американская Коллегия Акушеров и Гинекологов;
  • SMFM – Общество Медицины Матери и Плода;
  • ESHG – Европейское Общество Генетики Человека;
  • ASHG – Американское Общество Генетики Человека.

Неивазивный пренатальный тест относится к генетике и является относительно новым, быстро развивающимся диагностическим направлением, возникшим в 70-е годы прошлого века.

Тесты проводились у пациенток с высоким уровнем генетического риска, но к глобальным результатам такой подход не привел. Для предупреждения анеуплоидий желательно всем беременным проходить неинвазивный пренатальный скрининг.

Такой подход позволяет выделить группу риска среди беременных и вычислять хромосомные мутации плода по анализу крови матери.

С помощью пренатального теста обнаруживают такие тяжелые хромосомные отклонения:

СиндромыОпределениеКраткое описание
ДаунаТрисомия по 21 -й хромосоме (47 хромосом)Существует несколько форм синдрома со своими многочисленными проявлениями. Дети имеют характерную внешность, отставание в развитии, различные пороки и заболевания.
ЭдвардсаТрисомия по 18-й хромосомеДефекты мозгового и лицевого черепа, маленькие нижняя челюсть и рот, узкие и короткие глазные щели, деформированы ушная раковина, грудина. Характерны пороки сердца, нарушение развития мозговых структур. Более 60% умирает на первом году жизни.
ПатауТрисомия по 13-й хромосомеУмеренная микроцефалия, нарушение развития ЦНС, многочисленные дефекты внешности и пороки внутренних органов. Почти 95% умирает на первом году жизни.
КлайнфельтераМозаичный кариотипРаспространенная эндокринная болезнь, болеют мальчики. Характерна гинекомастия, бесплодие, эректильная дисфункция, гипогонадизм, ограниченные интеллектуальные способности.
Шерешевского-ТернераМоносомия ХО (по Х-хромосоме)Отклонения физического развития, низкорослость и половой инфантилизм.

С помощью ДНК-тестов можно определить пол ребенка на раннем гестационном сроке в том числе при многоплодной беременности (но не более трех плодов). Точность тестов – 99%.

Показания

Неинвазивный пренатальный тест обязательно назначается в следующих случаях:

  • если женщина забеременела в 35 и более лет;
  • будущий отец 45-летнего и старше возраста;
  • беременная входит в группу риска по результатам скрининга;
  • беременная с привычным невынашиванием;
  • угроза прерывания на раннем этапе гестации;
  • отягощенный семейный анамнез;
  • один из партнеров является носителем хромосомной перестройки;
  • перенесенный медаборт по показаниям, когда тест показал хромосомную аномалию;
  • есть дети (ребенок) с хромосомной мутацией.

Медицинская практика показала, что дети с синдромом Дауна в большинстве случае появляются в молодых семьях, рожденные здоровыми матерями без отягощенного анамнеза. Поэтому тест важно пройти на раннем сроке, чтобы можно было тщательно обдумать, сохранять беременность или прерывать.

Неинвазивный тест нецелесообразно выполнять при весе беременной больше 140 кг что обусловлено недостаточной концентрацией ДНК плода для исследования, также после трансплантации костного мозга или стволовых клеток.

Методы исследования

Тесты для исследования могут использоваться разные, но основаны они на одном принципе – секвенирование (определение последовательности аминокислот и нуклеотидов), позволяющем описать первичную структуру ДНК. Современные технологии секвенирования (СНП) дают возможность узнать информацию о нескольких участках генома одновременно, в этом их главное преимущество перед ранними способами секвенирования.

Неинвазивный пренатальный ДНК тест осуществляется с помощью таких вариантов секвенирования:

  1. Амплификация – удлинение цепочки ДНК путем создания дополнительных копий, содержащих участки структурного гетерохроматина или определенные гены. Либо в процессе ПЦР (полимеразной цепной реакции) производится накопление копий определенной последовательности нуклеотидов.
  2. Многократное лигирование (ферментирование) короткого участка ДНК (олигонуклеотида), осуществляемое путем расщепления длинных полинуклеотидов или с помощью химического синтеза.

За один цикл в процессе теста генерируются сотни мегабаз (миллион нуклеотидов) и гигабаз (миллион пар азотистых оснований) нуклеотидных последовательностей.

Секвенирование выполняется в несколько этапов:

  • Создание геномной библиотеки (набор ДНК генома отдельного организма) по принципу случайных последовательностей которые можно будет соединить с общедоступными последовательностями.
  • Создание фрагментов ДНК (ампликонов) в качестве образцов. Для этого используют ПЦР. На сегодня разработаны варианты мультиплексной полимеразной цепной реакции, использующей не два, как ранее, а сразу несколько праймеров (короткий участок ДНК), позволяющей создать дополнительные копии ДНК в ходе одного теста.
  • Определение первичной структуры всех ДНК-фрагментов.

Нормальный неинвазивный пренатальный тест показывает одинаковое представительство всех хромосом. При трисомии представительство соответствующих хромосом (13,18,21, X, Y) повышено.

На каждый исследуемый фрагмент получают до 10 млн последовательностей, длина образца – 50 нуклеотидов.

Из исследования исключаются повторы, низкое качество считывания, чтобы не произошли аномальные скачки хромосомной представленности.

Современный ДНК тест высокопроизводителен, полученная информация обрабатывается с помощью математических алгоритмов, что позволяет сканировать геном индивидуума и получить результаты в кратчайший срок.

СНП стали значительно дешевле, а главное, эффективнее секвенаторов прошлого поколения.

Это сказывается на цене диагностики (тест стал более доступным), а также на результатах пренатального исследования, которые стали гораздо точнее.

Что такое Неинвазивный Пренатальный Тест -НИПТ?

Неинвазивный пренатальный тест

Продолжаем тему  диагностики пороков развития плода.

И здесь поговорим о  новом современном  дополнительном методе исследования – как НИПТ (Неинвазивынй пренатальный тест).

Но вначале  подытожим, чтобы все уложилось по полочкам. И так:

Все беременные женщины, встающие на учет,  проходят  Пренатальный скрининг 

Он включает в себя УЗ исследование в сроке 12-13 недель и сдачу крови на определение эмбриоспецифических  маркерных белков PAPP-A и ХГЧ.

На основании этих  показателей: ТВР ( толщина воротникового пространства по УЗИ) + PAPP-A+ ХГЧ+ возраст – рассчитывается индивидуальный риск и выявляются группы риска по основным хромосомным патологиям (с-м Дауна, с-м Патау, с-м Эдвардса + дефект нервной трубки)

При отсутствии УЗИ маркеров( ТВП менее 2,5 мм) + на биохимическом скрининге риск ˂1:300, то  беременность ведется как обычная.

Если при УЗ исследовании выявляются какие — либо пороки развития плода или ТВП более 2,5 мм, то беременная женщина направляется к генетику  для проведения ИПД-инвазивной пренатальной диагностики.

При расширенной шейной складке есть вероятность других хромосомных аномалий, которые при НИПТ не определяются. Поэтому в этом случае нужно сразу идти на ИПД, на биопсию хориона или амниоцентез, не тратить время и деньги,и сразу исключить хромосомные отклонения.  В этом случае НИПТ не проводится!

Если при УЗ исследовании не выявлено никаких отклонений, ТВП менее 2,5 мм, то тогда можно сдавать либо Биохимический скрининг ( БХ), либо НИПТ.

Если вы проводите биохимический скрининг(БХ) и получаете высокий риск, то идете на консультацию к генетику и проводите либо Пренатальный скрининг 2 триместра , либо НИПТ

Если позволяют финансы, то можно сразу сделать НИПТ.

Этот тест достаточно дорогой,  он не может пока использоваться  как скрининг.

 И так, что такое НИПТ?

Это  дополнительный современный пренатальный тест с более высокой точностью и чувствительностью на выявление тех же основных хромосомных аномалий по с-му Дауна, с-му Патау и с-му Эдвардса и половым хромосомам X и  Y

Неинвазивный пренатальный тест основан на определении в крови беременной  женщины  элементов внеклеточной ДНК плода,  которая обнаруживается уже с 5 недели беременности и достигает уровня, достаточного для диагностики к 9 – 10 неделе беременности.

Для получения достоверного результата НИПТ, должна быть определена доля плодовой ДНК в крови матери, которая должна быть ≥4−5%. Чем выше уровень фетальной ДНК, тем достовернее расчет.

НИПТ можно использовать у повторно беременных, поскольку ДНК плода исчезает из крови матери в течение суток после завершения беременности (период полураспада 2 ч.).

Этот метод появился в России совсем недавно.

Именно с обнаружения  в 1997 г в крови матери  ДНК плода,  отрылись новые возможности исследовать ДНК плода напрямую, не подвергая беременную  риску.

Если точность Пренатального скрининга   1 триместра составляет около — 90% с частотой ЛПР (ложноположительных результатов) -5%,

То применение Неинвазивных пренатальных тестов (НИПТ) позволило повысить точность пренатального тестирования до 99% с частотой ЛПР менее, 0,1%.

При всех тестах, даже самых точных может в очень очень низком проценте случится ложный  результат, когда заболевание есть, а тест его не определил.

НИПТ —  не имеет 100% точности.

С чем связан ложноположительный результат ( ЛПР)?

  •  Мозаицизм это когда в одной ткани присутствуют клетки одновременно с нормальным кариотипом и аномальным. При проведении НИПТ Исследуется  ДНК, попадающее из плаценты.В плаценте до 1% находится мозаичных клеток.

У ребенка тоже может быть проявление мозаицизма, но значительно редко.

У плаценты это может быть до 1% . У самого плода может быть нормальный кариотип,  в то время когда в плаценте могут находится патологические клетки.

Поэтому тест всегда требует подтверждения. Даже если это очень точный тест, то в случае получения плохого результата , мы не можем направить на прерывание, не подтвердив его ИПД

И в данном случае делается амниоцентез. Берутся околоплодные воды, а там находятся только клетки самого плода. Клетки эпителия кожи плода.

И только сделав ИПД, мы можем помочь в принятии решения.

Когда беременность двуплодная и один плод замирает. Этот плод мумифицируется и не всегда его можно увидеть, если это произошло на очень ранних сроках. И вот в кровоток может поступать ДНК замершего плода и количество может превалировать и давать ЛПР

У нас  в России не принято  сдавать кариотип, как это делают за границей, как знать свою группу крови, например.

У нас сдают кариотип, когда возникают проблемы. Когда уже есть выкидыши, неразвивающиеся беременности, когда родился больной ребенок… И только тогда сдают кариотип.

Весь мир делает по другому. Кариотип сдают либо сразу после рождения, либо перед вступлением в брак.

С возрастом количество клонов клеток с одной Х хромосомой возрастает у женщин.  Может быть мозаика по ХХХ. Внешне женщине это никак не мешает жить. И эти клетки матери, могут принять как за плодовые.

НИПТ – является  неинвазивным и безопасный скрининговым методом, более точным, с очень маленьким % ЛПР, чем пренатальный скрининг и более сужает группу риска на хромосомные аномалии. Но его проведение никак не исключает обязательное проведение УЗИ.

Кому можно рекомендовать  НИПТ?

  • Женщинам  из группы риска по хромосомной аномалии после проведения пренатального скрининга 1 или 2 триместра
  • Женщинам, у которых прежняя беременность завершилась рождением ребенка с хромосомными отклонениями, выкидышем на раннем сроке, замиранием на любом сроке.

    ( Таким женщинам можно рекомендовать сразу пройти НИПТ, не делая Пренатальный скрининг)

  •  Женщинам после 35 лет. (С возрастом у женщин стареют и яйцеклетки, ухудшается их репродуктивное качество, а потому риски рождения детей с генетическими аномалиями тем выше, чем выше возраст беременной.

    Всем женщинам старше 35 лет, которые собираются родить ребенка, желательно сделать такой тест.)

  •  Женщинам,  которым инвазивные методы запрещены по медицинским показаниям, например, при угрозе прерывания беременности.

НИПТ — это тест  с большой чувствительностью прежде всего для    трисомии по 21, 13, 18 хромосом : с-м Дауна, с-м- Патау, с-м Эдвардса и половые хромосомы  X иY.

Поэтому НИПТ сдается в первую очередь на Синдром Дауна, Эдвардса и Патау!

Для синдрома Дауна – 99%. Для Синдрома Эдвардса и Патау —  уже 90-93%. Для половых хромосом —  чувствительность этого теста не превышает 90-93%

Количество фетальной фракции очень важно. Чем выше этой фракции, тем точнее этот тест. Пороговым количеством  является 4%. Только тест Панорама  — выбрал для себя- 2,8%

Этот тест  не диагностирует  аномалии по другим хромосомам.

Дополнительно  НИПТ  определяет пол ребенка, а также его резус-фактор и группу крови.

Обычно НИПТ  рекомендуется   генетиком, после прохождения пренатального скрининга 1 и/или 2 триместра , либо женщина сама может выбрать этот тест, не делая биохимический скрининг 1 и 2 триместра.

В настоящее время у  нас в стране   НИПТ пока не может использоваться в качестве скрининга для всех женщин из-за высокой стоимости теста.

Какие тесты используются для проведения НИПТ?

Для проведения НИПТ используется целый ряд тестов, соответствующих необходимым  критериям.

Каждый тест имеет свои особенности и диапазон  определяемых проблем.

У одних тестов диапазон рассматриваемых синдромов и аномалий шире, другие определяют лишь стандартный минимальный набор хромосомных нарушений. Точность примерно одинакова.

* Тест PANORAMA — компания Natera из Калифорнии. Этот тест работает начиная уже с 9 недель беременности. Обеспечивает его высокую точность.

* Тест Harmony — компания Arisona в Калифорнии. Широко представлен на рынке. С 10 недели беременности. Тест Harmony на сегодня имеет наибольшее количество клинических и независимых многоцентровых исследований с включением наибольшего числа женщин.

* Тест Veracity. Применяется с 10 недели. Новый европейский тест, который очень хорошо себя зарекомендовал.

* DOT-тест. С 10 недели. —  делается у нас в МГУ

Тест «PRENETIX» — выполняется по технологии компании Roche Diagnostic (Harmony).

Подготовка  

Проведение НИПТ не требует от беременной  никакой подготовки. Забор крови берется не натощак, минут за 20 можно съесть немного шоколада. Для исследования берут  обычный анализ крови из вены крови.

Этапы проведения исследования.

Забор венозной крови → центрифугирование — выделение внеклеточной ДНК → секвенирование.

Метод секвенирования позволяет определить два генома. Один  материнский , другой  плодовый → биоинформатический анализ данных.

Алгоритмы с математической точностью позволяют подсчитать вероятность той или иной патологии не просто в процентах, а в десятых и сотых долях процента.
Весь этот процесс обычно занимает от 10 до 14 дней.

Ограничения  для проведения НИПТ

  • Многоплодная беременность
  • Донорские программы или суррогатное материнство
  • Носительство супругами хромосомных аномалий
  • ТВП более 2,5 мм
  • Пересадка костного мозга или стволовых клеток
Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.