Hla-типирование супругов
HLA типирование
Проблема бесплодия, невынашивания беременности с каждым годом актуальнее и находится под пристальным наблюдением врачей. Частые выкидыши – это следствие сбоев в репродуктивной системе.
Современные технологии экстракорпорального оплодотворения помогают решить вопрос бесплодия, причиной которого стали не только эндокринные патологии, иммунологические проблемы, но и генетический фактор.
Для определения причин врачи назначают HLA типирование супругов (цена анализа доступна).
Информационные данные человека, а также склонность к определенным болезням сохраняются в микрочастице ДНК.
В настоящее время существует множество генетических тестов, с помощью которых можно точно установить причину сдвигов в здоровье и предсказать появление некоторых заболеваний.
В пренатальной диагностике исследования используются для обнаружения хромосомных изменений плода, а также генетической совместимости супругов.
HLA (Human Leucocyte Antigens) – человеческий лейкоцитарный антиген, который отвечает за генетическую совместимость. Клетки человеческого организма имеют на поверхности специфические белки — HLA антигены. За состав определенного HLA антигена отвечает конкретный ген 6 хромосомы.Исключительная комбинация HLA антигенов зависит от уникального сочетания HLA генов. Эмбриону от родителей достаются HLA гены, которые формируются в собственный набор. Этот комплекс такой же персональный, как и рисунок на пальцах. Благодаря HLA молекулам организм распознает чужеродные клетки: раковые, бактерии, вирусы.
Если существует болезнетворная угроза, вырабатываются антитела, которые препятствуют развитию болезни.
Типы и свойства HLA
Наиболее распространенными являются «классические» HLA антигены. Они бывают HLA антигенами 1 класса (HLA типирование 1 класса) и HLA антигенами 2 класса (HLA типирование 2 класса).
Отличительной особенностью HLA генов является их разнообразие: примерно 13 500 разновидностей генов. Данные разновидности объединены в группы – аллели. Но таких групп в каждом гене значительно меньше, чем количество разновидностей, например у гена DRB 1 их 13 (HLA типирование DRB 1).
Диагностика HLA комплекса – это типирование генов HLA. С помощью теста определяют, какие варианты генов имеются у определенного человека. При типировании генов HLA исследуются антигены I и II класса.
К первому классу относятся антигены, которые расположены поверх клеток. Типирование HLA II класса позволяет выявить антигены, расположенные на Т-лимфоцитах, моноцитах и на клетках, которые отвечают за иммунную реакцию.
При определении факторов самопроизвольных абортов, как правило, проводят типирование генов HLA II класса.
Применение HLA типирования
- Выявление совместимости тканей при трансплантации органов
- Диагностика и вероятность развития аутоиммунных заболеваний
- Выяснение причин репродуктивных аномалий
Для диагностических целей используют HLA типирование генов DRB 1, DGA 1 на уровне низкого разрешения. Типирование HLA DRB 1 проводится методами ПЦР.
HLA типирование и беременность
Для благополучной беременности необходимо, чтобы антигены родителей отличались. Сформированный зародыш обладает специфическими антигенами, «чужими» для материнского иммунитета. Организм беременной реагирует на клетки малыша запуском характерных механизмов, защищающих плод.
Если сходство HLA генов супругов превышает норму, то формируется эмбрион, схожий с материнскими клетками. Иммунная система беременной женщины распознает зародыш как чужеродного агента и уничтожает его. Такая реакция организма прогнозирует выкидыш.
Кроме того, HLA сходство является причиной врожденных изменений в развитии плода, слабого иммунитета у ребенка и токсикоза второй половины беременности.
Данную проблему позволяют решить современные методики экстракорпорального оплодотворения. При процедуре многие врачи не уделяют внимания генетическим аспектам, поэтому в некоторых случаях ЭКО неэффективно.
Для полноценной беременности учитывают аллели HLA генов родителей.
В парах, где есть случаи двух и более выкидышей, результаты HLA типирования (расшифровка проводится генетиком) свидетельствуют об увеличении количества некоторых аллелей.
Для диагностики иммунных форм невынашивания плода показательно HLA типирование II класса. Для анализа «HLA типирование» пара сдает кровь из вены. Из биологического материала выделяют белые клетки крови – лейкоциты, поскольку именно на них хорошо предоставлены HLA антигены.
Исследование проводится способом полимеразной цепной реакции. Обычно расшифровка HLA типирования говорит о том, сколько идентичных генов у супругов. Когда проводится типирование HLA II класса, то по окончании теста в бланке анализа указываются выявленные совпадения.HLA типирование 2 класса (расшифровка анализов требует участия специалиста) – это генетический тест, и трактует его врач генетик. В большинстве случаев совпадение супругов по двум или более HLA антигенам становится основным фактором прерывания беременности.
Важность анализа «HLA типирование» (сдать тест не составляет проблем) в том, что исследование дает возможность супружеской паре сделать осознанный шаг в пользу дальнейших проб оплодотворения, тщательно оценив риск осложнений.
На сегодняшний день медицина успешно лечит некоторые генетические отклонения, поэтому если есть совпадения, то это не трагично: существует масса терапевтических мер, позволяющих сохранить плод.
Рекомендуют анализ HLA типирования тем супружеским парам, которые длительное время не могут зачать малыша или если у женщины прошлые беременности заканчивались выкидышем. Если результаты показывают отклонения от нормативов, то назначают медикаментозное лечение для сохранения плода.
Иммунитет обеспечивают антитела
Инфекционный процесс начинается при внедрении в организм патогенной микрофлоры. После проникновения болезнетворных бактерий организм начинает «защищаться», т. е. вырабатывать антитела, которые активно противостоят инфекции.
Антитела – специфические белки (глобулины), сформированные при участии антигена. Содержатся антитела в сыворотке. Исследование по выявлению антител проводится на основе иммунологических реакций.
Результаты анализа показывают наличие внутриклеточных форм глобулинов и антигенов, а также антител, находящихся на поверхности клетки.
После победы над инфекционными возбудителями в организме остаются антитела, которые обеспечивают выраженный иммунитет. Если идентичные возбудители повторно попадают в организм, то под влиянием антител они погибают. У человека, который переболел определенным инфекционным заболеванием, формируется собственная защита – иммунитет.Активная иммунизация – методика, при которой в организм женщины вводят насыщенный раствор лимфоцитов мужа.
В результате данной манипуляции иммунная система женщины способна отличить клетки супруга от своих клеток и угроза выкидыша значительно снижается.
По данным медицинской статистики, вовремя назначенное лечение эффективно в 70% случаев применения методики. Однако активная иммунизация предполагает длительную подготовку и сохранение возможности у ребенка наследственных недугов.
Пассивная иммунизация – это введение иммуноглобулинов, полученных от человека. Пассивная иммунизация дает непродолжительный эффект, но мгновенный.
Используют при этом человеческий иммуноглобулин или специальные сыворотки. Получают белок из плазмы крови взрослого человека. Перед использованием плазму тщательно тестируют на инфекции.
Препараты вводят в виде инъекций, внутримышечно. Увеличение антител отмечается на вторые сутки.
Если HLA типирование супругов говорит о нецелесообразности терапевтических мероприятий, то можно обратиться к донору. Пара имеет возможность подобрать донора спермы или яйцеклетки и осуществить искусственное оплодотворение. Процедура осуществляется в специализированных клиниках, которые занимаются вопросами бесплодия.
Типирование HLA B27
Типирование HLA В27 — наиболее популярный тест. Это антиген к молекулам основного комплекса генетической идентичности. Доказано, что молекула HLA В27 передает Т-лимфоцитам белковые микрочастицы, вызывающие воспаление суставов.
Артрит – аутоиммунное заболевание. Молекула В27 может принимать участие в процессе, направленном против собственных клеток, содержащих коллаген. Аутоиммунная реакция наступает при проникновении в организм бактериальной инфекции.
Возбудителями патологии являются:
- Клебсиелла (воспаление легких)
- Бактерии кишечной группы
- Хламидии
Наличие антигена HLA В27 увеличивает возможность воспаления нескольких суставов или патологическое поражение крестцово-подвздошного сплетения. Есть данные, что HLA В27 встречается:
- у пациентов с болезнью Бехтерева
- при реактивных артритах (аутоиммунное воспаление суставов аллергической природы после перенесенных инфекционных заболеваний мочеполовой сферы или кишечника)
- синдром Рейтера
- артрит при псориазе
- артриты, связанные с патологиями кишечника
Если антиген HLA В27 отсутствует, то данные заболевания маловероятны. При наличии молекулы В27 врачи рекомендуют своевременно лечить бактериальные инфекции, избегать хламидиоза.
В медицине HLA типирование актуально в контексте «иммунологического бесплодия». Это не удивительно, ведь вопрос репродукции и реализации себя в роли родителя – очень важный.
Поэтому сегодня ведущие мировые рекомендации, основанные на неопровержимых фактах, гласят: «HLA типирование, выявление цитотоксических антител против антигенов супруга рекомендуются для обследования пар с невынашиванием плода».
Данный генетический тест проводят при изучении предрасположенности к определенным заболеваниям:
- ревматоидный артрит
- красная волчанка
- сахарный диабет
- повышенная активность щитовидной железы
- рассеянный склероз
- аутоиммунный гепатит
- бесплодие
Исследование проводят в специализированных лабораториях, в условиях абсолютной стерильности. Цена диагностики:
- Наследственная восприимчивость к сахарному диабету 1 типа по локусам генов системы HLA II класса – 5 945 руб.
- Интерлейкин 28 бета – IL28В, генотипирование – 1 200 руб.
- Генетический тест HLA типирование В27 – 1 900 руб.
- Типирование генов группы HLA II класса – 5 100 руб.
Специальной подготовки для исследования не требуется. При проблемах с зачатием сдавать кровь необходимо обеим супругам. Интерпретацией результатов занимается квалифицированный специалист. Полученную информацию запрещено использовать для самостоятельной постановки диагноза и самолечения.
Начните свой путь к счастью — прямо сейчас!
HLA-типирование перед ЭКО
Иммунные нарушения в организме супругов способствуют многочисленным неудачам при экстракорпоральном оплодотворении. К одной из самых распространённых категорий иммунных нарушений относится идентичность мужа и жены по системе HLA-антигенов.
Анализы на HLA-совместимость супругов в последнее время всё чаще рекомендуют тем парам, у которых уже были неудачные попытки ЭКО. HLA-типирование мужчины и женщины, которые решили прибегнуть к ЭКО, как к последней возможности обзавестись потомством, даёт возможность определить степень «несовместимости».
Как правило, HLA-типирование назначают с целью уточнения причины бесплодия, а также для определения методов дальнейшего лечения.
HLA- совместимость
HLA–антигены присутствуют на поверхности почти всех клеток организма, но максимально полно данные молекулы представлены на лейкоцитах, благодаря чему и получили своё название. У каждого человека имеется свой персональный набор HLA-антигенов.
Благодаря их молекулам, организм обладает способностью различать свои клетки от чужеродных, вырабатывая при необходимости специфические антитела. Они способствуют уничтожению чужих агентов, в роли которых могут выступать вирусы, раковые клетки, бактерии. Наличие HLA-антигенов у каждого человека определяется точно таким же персональным набором HLA-генов.
Ребёнок получает от своих родителей абсолютно индивидуальное сочетание HLA-генов, сходное по своей уникальности с отпечатками пальцев. Существует 2 класса HLA-антигенов: антигены локусов A, B и C и антигены локусов DR, DP и DQ.HLA-антигены первого класса встречаются на поверхности любых клеток, HLA-антигены второго класса присутствуют только на поверхности тех клеток, которые принимают участие в иммунологических реакциях. К ним относятся активированные Т-лимфоциты, В-лимфоциты, моноциты, дендритные клетки и макрофаги.
HLA- совместимость и беременность
Наследуя антигены тканевой совместимости, плод получает от матери и отца по одному гену каждого локуса. Таким образом, половина антигенов наследуется от отца, из-за чего ребёнок, которого вынашивает женщина, является для неё наполовину чужеродным. При нормальном стечении обстоятельств, подобный фактор относится к разряду обычных физиологических явлений.
Запуск иммунологических реакций, обусловленный этим процессом, обеспечивает сохранение беременности. Формирование клона иммунных клеток способствует выработке особых блокирующих антител. В организме не беременной женщины иммунные клетки, выполняющие роль разведчиков, находят на поверхности любых клеток белки главного комплекса HLA-антигенов.
Обнаруживая «чужаков», например, раковые клетки или занесённые извне вирусы, иммунная система отдаёт приказ на уничтожение. Если бы при возникновении беременности этот процесс происходил в таком же порядке, то у плода не было бы шанса выжить, поскольку для организма матери он является «чужаком».
Но подобного не происходит по той причине, что во время беременности иммунная система матери не различает клеточные структуры плода. В этот период В-лимфоциты эндометрия способствуют выработке защитных антител, которые направлены против HLA-антигенов, полученных ребёнком в наследство от отца.
Данные антитела обеспечивают блокировку HLA-антигенов отца, защищая их от материнских иммунных клеток, которые выступают в роли разведчиков, благодаря чему последние не в состоянии осуществить передачу информации клеткам-киллерам.
По этой причине иммунная реакция организма матери не активируется в ответ на появление изначально «чужих» клеток, и эмбрион благополучно приживается. При этом огромное значение имеет отсутствие идентичности HLA-антигенов супругов, поскольку лишь в этом случае механизм запуска блокирующих антител, способствующих сохранению беременности.
Если же HLA-антигены родителей являются сходными, то антитела, главной задачей которых является блокировка отцовских HLA-антигенов, не вырабатываются. В результате клетки-разведчики воспринимают плод в качестве инородного тела, включая против него систему уничтожения. Итогом этого процесса становится выкидыш. Чем больше антигенов HLA совпадает у родителей, тем меньше шансов выносить беременность.
HLA-типирование
Наличие HLA-идентичности очень часто становится причиной женского бесплодия, либо привычного невынашивания. Именно поэтому пациенткам, избравшим в качестве метода лечения бесплодия экстракорпоральное оплодотворение, врачи часто рекомендуют пройти вместе с мужьями HLA-типирование.
Показаниями к HLA-типированию являются не только бесплодие, но и наличие в анамнезе выкидышей или неудачных попыток ЭКО. HLA-типирование подразумевает анализ полиморфизма HLA и осуществляется он, как правило, двумя способами. Первый из них, классический, базируется на микролимфоцитотоксическом тесте.
Применение молекулярно-генетического метода подразумевает проведение полимеразной цепной реакции. Классическое, или серологическое HLA-типирование, осуществляется на выделенных клеточных популяциях.
Поскольку антигены основного комплекса гистосовместимости большей частью несут на себе лимфоциты, для определения антигенов l класса используется суспензия Т-лимфоцитов, для антигенов II класса — суспензия В-лимфоцитов. Для того, чтобы выделить из цельной крови требуемые клеточные популяции, применяются два способа – иммуномагнитная сепарация или центрифугирование.Как правило, в основном используется первый метод, поскольку второй чаще становится источником ложноположительных данных по причине гибели части клеток. Для проведения лимфоцитотоксического теста HLA-типирования используется специальная сыворотка, в состав которой входят антитела к различным видам антигенов обоих классов.
В процессе проведения серологического теста, изучая, какой вид сыворотки вступает в реакцию с лимфоцитами, удаётся выяснить HLA-тип. В случае возникновения реакции между сывороткой и клеткой, на поверхности последней формируется комплекс антиген-антитело. Если в сыворотку влить раствор, в состав которого входит комплемент, разрушение и гибель клетки неизбежны.
Для оценки серологического метода HLA-типирования используется флуоресцентная микроскопия, причём красная флуоресценция означает наличие позитивной реакции, а зелёная – негативной. При определении результата этого метода учитывается специфичность сывороток, проявивших реакцию, а также определённых групп антигенов, вступивших в перекрёстную реакцию.
Кроме того, принимается во внимание также и интенсивность цитотоксической реакции. У этого метода HLA-типирования существуют определённые недостатки:- низкая экспрессия HLA-антигенов или слабое сродство антител;- существование перекрестных реакций; — отсутствие белковых продуктов у некоторых HLA-генов.
Применение молекулярно-генетических способов HLA-типирования подразумевает использование уже готовых синтетических образцов, вступающих в реакцию с ДНК, а не с антигенами, что позволяет с точностью определить присутствие в пробе конкретных типов антигенов.
Этот способ, помимо прочего, не нуждается в наличии живых лейкоцитов, с его помощью можно изучить любую клетку организма, а для исследования необходимо ничтожно маленькое количество крови. В некоторых случаях достаточно лишь соскоба, взятого со слизистой оболочки рта. При использовании молекулярного способа HLA-типирования применяется метод ПЦР.
Первый этап – это получение из цельной крови чистой геномной ДНК, тканей или лейкоцитарной суспензии. После этого в пробирке, с помощью коротких одноцепочных ДНК, специфичных по отношению к конкретному HLA –локусу, получают копию имеющегося образца ДНК. Эту операцию повторяют много раз, с целью получения количества ДНК фрагментов, достаточного для визуальной оценки.
С этой целью реакционные смеси подвергают гибридизации или электролизу, а затем устанавливают наличие специфической амплификации. Молекулярно-генетическое HLA-типирование считается более точным, чем серологическое. Обусловлено это наличием стандартизированных образцов.
Помимо этого, молекулярное HLA-типирование предоставляет большее количество важной информации, касающейся новых аллелей ДНК, а также обеспечивает более качественную детализацию за счёт идентификации и антигенов, и самих аллелей. Последние, в свою очередь, определяют наличие на клетке конкретного типа антигена. Если совпадений было много, то зачатие не наступит без соответствующей иммунотерапии. Курс лечения проводят до начала протокола экстракорпорального оплодотворения, и занимает он обычно 2-3 месяца. Пациентке назначают препараты иммуноглобулинов, например, Интраглобин, Октагам и другие. Ещё один курс лечения проводят и в начале беременности, это помогает максимально снизить риск возникновения реакции отторжения эмбриона.HLA-типирование при планировании беременности
Многочисленные неудачи искусственного оплодотворения могут быть связаны с нарушениями иммунной системы у супружеской пары. Особенно часто встречаются сходные HLA-антигены мужа и жены.
Таким образом, пары, которые уже делали ни раз неудавшиеся попытки ЭКО, часто рекомендуют пройти тестирование на HLA-совместимость. Оно позволит выявить уровень «несовместимости». Тем самым HLA-типирование прояснит причины бесплодия и поможет принять решение о дальнейшей стратегии лечения пары.
Что такое HLA-типирование?
Гены HLA (человеческий лейкоцитарный антиген) представляют собой семейство генов, расположенных на 6-й хромосоме, которые кодируют белки, играющие важную роль в регуляции иммунного ответа.
У каждого человека есть несколько генов HLA и каждый ген сильно различается в своем составе среди особей в популяции. Копии генов HLA , которые варьируются, упоминаются как «аллели».
Разные аллели однотипного гена HLA могут кодировать белки, имеющих несколько различных функций.
HLA гены существуют в виде белков в организме человека в различных формах. Некоторые из них только в клетках крови. Другие во всех различных тканях организма. Основная работа этих белков отклонять ткани пересаженных от одного человека к другому, в качестве защиты.
Генетическая совместимость между супругами по HLA
Каждый ген может быть преподнесен во множестве вариаций. Генетики и иммунологи называют их разнообразными сочетаниями аллелей, которые делают возможным изменять генетические комбинации. Эта схожесть аллелей выявляет генетическую совместимость или несовместимость между двумя людьми.
Ребенок приобретает один ген, набранный от отца и матери. Сходство супругов, с точки зрения гистосовместимости, создает «похожесть» с тканью эмбриона (зародыша).
Это сходство является поводом для того, чтобы иммунитет будущей матери не был деятельным, и реакция, важная для оплодотворения или поддержания беременности, не начиналась. По этой причине, при пересадке эмбриона ослабляется иммунная система женщины.
Нередко, бесплодие или постоянный выкидыш случается из-за генетических особенностей супругов.
Важные обследования
Для определения степени гистосовместимости женщины и мужчины, проводится HLA-типирование 1 класса и HLA-типирование 2 класса. Для исследования у супругов берут кровь из вены. Соответствия, выявленные в ходе исследования, сообщаются в форме анализа HLA – типирования супругов.
Расшифровка HLA анализа в одиночку невозможна, поэтому вам необходимо обсудить этот вопрос с иммунологом.
Совпадение у супругов 2 или более антигенов HLA приводит к выкидышу или самопроизвольному аборту на небольших сроках (от 2-х до 3-х недель от зачатия), поэтому, девушка может даже не узнать о факте зачатия.
Часто доктора говорят об этом, как о мудрости природы, она останавливает последующее формирование нежизнеспособных организмов или организмов с наследственными заболеваниями. В данном случае, остаются бессмысленными и методы ЭКО.Первопричина состоит в том, что во всех людях есть склонность к той или иной болезни. Сама по себе она не представляет опасности для большинства потомства. Тем не менее, в ситуациях, когда существует связь между двумя людьми, имеющих ту же предрасположенность к одной болезни, вероятность того, что ребенок родится и не будет страдать от этого заболевания, значительно снижается.
Следующие шаги в HLA
Вопрос: «Как быть дальше?» беспокоит все супружеские пары, у которых были обнаружены генетические сходства по результатам HLA.
Чтобы ответить на него, пара должна решить, захотят ли они совершать усилия снова и снова, чтобы зачать общего малыша, оценивая все риски, или воспользуются услугами донорских банков спермы.
Так как выбирать будет очень непросто, перед принятием решения, вы должны удостовериться, что у вас имеется достаточно сведений. Если понадобится, выясните точку зрения нескольких экспертов в области генетики и иммунологии.
Если супруги выбирают дальнейшие попытки зачатия общего ребенка, мы можем рекомендовать иммунизацию — активную или пассивную.
Активная иммунизация
На иммунитет женщины увеличивается антигенная нагрузка, при введении концентрированной культуры лимфоцитов мужа или донора. С помощью данного метода организм женщины научится узнавать клетки супруга. Данный метод осуществляется при помощи медикамента, сделанного из крови супруга или донора.
Позиция докторов (генетиков и иммунологов), касательно результативности иммунотерапии лимфоцитов, были поделены одинаково. Первая половина этого метода рассматривает его как возможность повысить рождаемость, а другая — не видит никакого смысла. Определенно, активная иммунизация не исследована полностью.
Конечных сведений о ее результативности пока нет. Но, все же, некоторые ученые полагают, что этот метод предоставит возможность родить ребенка, но не полностью избавит родителей от вероятной опасности появления на свет ребенка с наследственными болезнями.К сожалению, эта процедура иммунизации лимфоцитов возможна только в некоторых мегаполисах.
Пассивная иммунизация
Пассивная иммунизация не требует продолжительной подготовки. Показатели ее эффективности всегда различны. Этот метод заключается в введении иммуноглобулина, как правило, в три этапа.
Если вы решите для себя использовать донорский материал, то в ближайшем будущем, вы сумеете стать мамой и папой крошечного малыша, даже если для вас это было невероятно трудным решением.
HLA-типирование супругов
Как бы это печально не звучало, но количество бесплодных пар возрастает ежегодно. И причиной этого являются различные факторы, ведущие к нарушению функциональности репродуктивной системы – неправильное питание, пассивный образ жизни, вредные привычки и т.д.
Но, существует определенная группа супружеских пар, бесплодие которых обуславливается иммунными нарушениями, препятствующие нормальному развитию эмбриона и приводящие к постоянным самопроизвольным выкидышам. Довольно часто в таких парах беременность и вовсе не наступает, в результате чего у них возникает желание воспользоваться помощью вспомогательных репродуктивных технологий.
Однако, имея такие нарушения, даже ВРТ остаются бессильными. Как правило, даже после нескольких проведенных ЭКО, беременность не наступает. Именно поэтому супругам назначается HLT-типирование, которое позволяет выявить степень несовместимости конкретной женщины с конкретным мужчиной, а также причину бесплодия.
HLT-типирование: что это такое?
В каждом человеческом организме присутствуют HLA-антигены, находящиеся на поверхности каждой клеточки.
Эти антигены обладают способностью распознавания своих клеток от чужеродных и оповещения об этом иммунную систему человека.
При появлении чужеродных клеток, HLA-антигены начинают вырабатывать свою «армию» антител, разрушающе воздействующие на чужих агентов (вирусы, бактерии или клетки рака).
Абсолютно каждый организм имеется свой набор таких антител. И анализ на HLT-типирование позволяет выявить, какой набор антител имеет каждый из супругов.
В норме у мужчины и женщины, которые планируют стать родителями, набор HLA-антигенов должен быть абсолютно разным. Если происходит сходство каких-либо HLA-антиген, то это может являться одной их самых главных причин самопроизвольных выкидышей и наступления полного бесплодия.
Почему наблюдается бесплодие при совместимости HLA-антиген?
Чтобы понимать, почему происходят самопроизвольные выкидыши или наблюдается бесплодие при совместимости HLA-антиген, необходимо затронуть очень сложный процесс – зарождение новой жизни.
Когда происходит слияние половых клеток (гаметы и спермии), образуется одна большая клетка, которая затем превращается в эмбрион.
У гаметы и спермии имеется свой набор HLA-антигенов и при слиянии они образуют новый набор HLA-антигенов, который принадлежит будущему ребенку, состоящий на 50% из папиных антигенов и 50% маминых.
Когда образуется новая клетка со своим набором HLA-антиген, организм не воспринимает ее как чужеродную, потому что она является наполовину «своей». Он понимает, что наступила беременность и начинает запускать иммунологическую реакцию на ее сохранение.
Если же происходит слияние клеток со схожим набором HLA-антиген, то организм воспринимает образовавшуюся новую клетку как естественное явление. Он не понимает того, что наступает беременность и защитные функции не включает.
В результате этого новая клетка остается уязвимой перед материнскими иммунологическими клетками, так как отцовские HLA-антигены остаются без защиты, а потому быстро погибает. Именно поэтому происходит либо отторжение эмбриона, даже после его подсадки, либо беременность не наступает вообще.
Чем больше у семейной пары схожих HLA-антигенов, тем меньше вероятность наступления беременности!
Кому показано HLT-типирование?
HLT-типирование рекомендуется проводить тем женщинам:
- у которых наблюдаются регулярные выкидыши при естественном оплодотворении;
- у которых беременность не наблюдается в течение нескольких лет при условии, что она не использует средства контрацепции во время половых контактов;
- которые уже неоднократно пытались забеременеть при помощи ВРТ.
Как проводится HLT-типирование?
HLT-типирование – это анализ полиморфизма HLТ, который может проводиться несколькими способами. Но прежде чем рассказывать о них, хотелось бы поговорить о классификации HLA-антиген. Их подразделяют на 2 класса:
- 1-й – находятся на поверхности всех клеток;
- 2-й – находятся только на поверхности иммунологических клеток.
А теперь о способах проведения HLT-типирования.
Классический
Во время него применяется микполимфоцитотоксический метод исследования. Так как большая часть клеток несет на себе антигены лимфоциты, во время лабораторного исследования используется несколько суспензий. Для определения антиген первого класса Т-лимфоцитов, для второго класса – В-лимфоцитов.
Для выявления отдельных популяций клеток из общей массы, лаборантами используется иммунологическая сепарация. С этой целью также может быть использовано центрифугирование, однако оно приводит к гибели большинства клеток, а потому применяется очень редко.
Во время теста используется сыворотка, в которой присутствуют антигены, относящиеся сразу к двум классам. После вступления в реакцию с HLT-антигенами, лаборантам удается выяснить тип HLT человека.
Происходит это следующим образом: если реакция есть, на поверхности клетки возникает антиген-антитело. И если в нее влить специальный раствор, то клетка начнет разрушаться, а после и вовсе погибнет.
Для того, чтобы лаборанты смогли дать адекватную оценку проведенному тесту, во время HLT-типирования применяется флуоресцентная микроскопия, которая окрашивает те или иные реакции в определенные цвета. Красный обозначает наличие положительной реакции, зеленый – негативной.Несмотря на свою информативность, классический метод проведения HLT-типирования имеет свои недостатки:
- наличие перекрестных реакций, что дает немного искаженные результаты;
- отсутствие на поверхности генов белка;
- слабое сродство применяемых во время теста антител.
Молекулярно-генетический
Данный метод исследования подразумевает под собой применение готовых синтетически образцов, которые вступают в контакт с ДНК человека, а не с «лабораторными» антигенами. Это увеличивает шансы выявления практически всех антигенов, присутствующих у человека.
Для проведения данного диагностического метода достаточно наличие одной клетки крови.
HLT-типирования молекулярно-генетическим методом проводится путем применения ПЦР. Сначала основной задачей лаборантов является получение чистой клетки ДНК, из которой им необходимо создать копию клетки при помощи коротких одноцепочных ДНК. Копий клеток делают много, после чего их подвергаю гибридизации и определяют присутствие специфической амплификации.
Данный способ диагностики предоставляет более точную информацию о наборе HLT-антител у человека и их сходстве с его партнером.
Если во время проведения ПЦР выяснилось, что совпадений HLT-антител у семейной пары много, то им назначается прохождение иммунотерапии. Курс лечения занимает несколько месяцев. Он может проводиться как перед естественным зачатием ребенка так и перед проведением ЭКО.
Стоимость
HLT-типирование – сложный генетический метод. Проводится он в специализированных клиниках и его стоимость может достигать 6000 рублей. Здесь цена вопроса во многом зависит от способа проведения исследования.